光照培養(yǎng)箱是在常規(guī)培養(yǎng)的基礎(chǔ)上進(jìn)行的改進(jìn),主要是通過(guò)添加CO2來(lái)滿足微生物培養(yǎng)所需的環(huán)境。主要用于組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,將二氧化碳培養(yǎng)框分為水套式和氣套式。
小心培養(yǎng)的細(xì)胞就這樣死掉了,是個(gè)很心痛的事情。其實(shí)影響細(xì)胞存活率的原因有很多,有時(shí)候并不是培養(yǎng)箱本身出了問(wèn)題,我們的許多操作對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果也是有很大影響的,今天為大家分享一下使用光照培養(yǎng)箱對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)應(yīng)該注意的問(wèn)題:
1.確保所有實(shí)驗(yàn)室材料都無(wú)菌
交叉污染是細(xì)胞培養(yǎng)的大敵。即使是輕微的污染,也可能毀了幾個(gè)星期的成果。因培養(yǎng)箱內(nèi)溫暖潮濕,真菌易生長(zhǎng),因此須注意定期清潔。此外,在將培養(yǎng)瓶、移液管及其他的相關(guān)物品放入超凈臺(tái)之前,應(yīng)用酒精擦拭干凈,以避免污染。
2.小心處理您的培養(yǎng)物
細(xì)胞培養(yǎng)的脆弱性怎么強(qiáng)調(diào)也不為過(guò)。劇烈搖晃,或連續(xù)的溫度波動(dòng)可能會(huì)對(duì)生長(zhǎng)產(chǎn)生不利的影響。確保培養(yǎng)箱是水平的,溫度均一,且遠(yuǎn)離電動(dòng)儀器。此外,盡量避免一次處理多個(gè)細(xì)胞系,因?yàn)樗赡軙?huì)影響細(xì)胞的基因型和表型。您還應(yīng)定期完成STR圖譜分析,以確認(rèn)細(xì)胞系的身份。
3.在使用前正確解凍細(xì)胞
盡管解凍看起來(lái)是個(gè)簡(jiǎn)單的步驟,但須操作得當(dāng),以免傷害細(xì)胞。長(zhǎng)時(shí)間暴露在高溫條件下會(huì)使細(xì)胞無(wú)法鋪板。因此,凍存管應(yīng)當(dāng)在37°C水浴中放置2分鐘,然后用條件培養(yǎng)基稀釋,以避免造成直接傷害。